Serum / Plasma zirkulatzen duen DNA kit-a

A-1 Hasierako laginean zelulen edo birusen kontzentrazio txikia —Zelula edo birusen kontzentrazioa aberastu.

A-2 Laginen lisi nahikoa - Laginak ez dira lisiaren bufferarekin ondo nahastu. 1-2 aldiz pultsu-zurrunbilo bidez ondo nahastea gomendatzen da. —K proteinaminaren jarduera gutxitzeak eragindako zelula lisi nahikoa. —Zelula lisi nahikoa edo proteinen degradazioa bainu epel nahikoa ez izateagatik. Ehuna zati txikitan moztea eta bainatzeko denbora luzatzea gomendatzen da lisatuaren hondakin guztiak kentzeko.

A-3 ADNaren xurgapen nahikoa. —Eta etanolik edo ehuneko baxuko ehunekoaren ordez etanolik ez zen gehitu lisatua biraketa zutabera transferitu aurretik.

A-4 Eluzio bufferraren pH balioa baxuegia da. —Erregulatu pH 8,0-8,3 artean.

Hondar etanola eluentean.

—Eluentean garbitzeko buffer hondarra dago. Etanola ken daiteke spineko zutabea 3-5 minutuz zentrifugatuta, eta gero giro tenperaturan edo 50 ℃ inkubagailuan jarri 1-2 minutuz.

A-1 Lagina ez da freskoa. —Laginaren DNA positiboa atera kontrol gisa, laginaren DNA degradatu den ala ez jakiteko.

A-2 Aurreko tratamendu desegokia. —Nitrogeno likidoaren gehiegizko ehotzeak, hezetasunak berreskuratzeak edo lagin kopuru handiegia eraginda.

Aurretratamenduak lagin desberdinen arabera aldatu behar dira. Landareen laginetarako, ziurtatu nitrogeno likidoan ondo ehotzen duzula. Animalien laginetarako, homogeneizatu edo ondo xehatu nitrogeno likidoan. Hautsi zailak diren zelula hormak dituzten laginetarako, hala nola G + bakterioak eta legamia, lisozima, litosasa edo metodo mekanikoak erabiltzea gomendatzen da zelula paretak hausteko.

4992201/4992202 Landareen DNA Genomikoaren Kitak erauzteko kloroformoa behar duen zutabeetan oinarritutako metodoa hartzen du. Bereziki egokia da hainbat landare laginetarako, baita landare hauts lehorra ere. Hi-DNAsecure Landare Kitak ere zutabean oinarrituta dago, baina fenol / kloroformoa erauzteko beharrik gabe, segurua eta toxikoa ez denez. Polisakarido eta polifenol eduki handiko landareentzat egokia da. 4992709/4992710 DNAquick Landare sistemak likidoan oinarritutako metodoa hartzen du. Fenol / kloroformo erauzketa ere ez da beharrezkoa. Garbiketa prozedura erraza eta azkarra da, laginaren hasierako kopuruetarako mugarik gabe; beraz, erabiltzaileek malgutasunez egokitu dezakete kopurua esperimentuen eskakizunen arabera. GDNA zatien tamaina handia etekin handiz lor daiteke.

ADN genomikoa gizakiaren odol osoaren lagin bolumen desberdinetatik atera zen TIANamp Blood DNA Kit bidez. Emaitzak ondorengoak dira. Emaitzak erreferentzia gisa zerrendatzen dira soilik, benetako erauzketaren emaitzak laginen baldintzen araberakoak dira.

Odol-koaguluen DNA erauzketa bi kit hauetan emandako erreaktiboak erabiliz egin daiteke, protokoloa odol-koaguluen DNA erauzteko jarraibide zehatzetara aldatuta. Odol-koaguluak DNA erauzteko protokoloaren kopia leuna eska daiteke.

Lagin berria 1 ml PBS, gatz normalarekin edo TE bufferarekin eten. Lagina homogeneizatu bidez erabat homogeneizatu eta hauspeakia hodi baten hondoan bildu zentrifugatzaile bidez. Bota supernatantea, eta suspertu berriro precipitatua 200 μl buffer GArekin. Honako DNA purifikazioa jarraibideen arabera egin daiteke.

Plasmako, serumeko eta gorputzeko fluidoen laginetan ADNm arazteko, TIANamp Micro DNA Kit gomendatzen da. Serum / plasma laginetatik gDNA birusa arazteko, TIANamp Virus DNA / RNA Kit gomendatzen da. Serum eta plasma laginetatik gDNA bakteria arazteko, TIANamp Bacteria DNA Kit gomendatzen da (lisozima bakterio positiboetarako sartu behar da). Listu laginetarako, Hi-Swab DNA Kit eta TIANamp Bacteria DNA Kit gomendatzen dira.

DNAsecure Landare Kit edo DNAquick Landare Sistema gomendatzen dira onddoen genomak erauzteko. Legamiaren genomak erauzteko, TIANamp Legamiaren DNA Kit gomendatzen da (litosasa norberak prestatu beharko luke).